由於艾滋病病毒感染和艾滋病的診斷必須準確、可靠，故HIV抗體的檢測要採用標準的血清學試驗。受檢者要到國家批准的艾滋病初篩實驗室先作初篩試驗，陽性者要再用兩種試劑作重複檢測，也就是複檢。若複檢一種或兩種試劑均爲陽性，再將標本送到國家批准的艾滋病確認實驗室做確認試驗。確認試驗常用免疫印跡法。經過以上過程確認HIV抗體陽性方可發出報告，再經流行病學調查和檢測後諮詢，才能最終確定診斷。
HIV感染可以通過檢測病毒的抗體、抗原、核酸或病毒培養來確定。目前，標準的檢測方法是血清學HIV抗體檢測，它是診斷艾滋病病毒感染者和艾滋病的主要指標和標準檢測項目。
艾滋病病毒感染的常規診斷方法是檢測HIV抗體，而且以確認試驗爲最終判定標準。有的人可能初篩和複檢均爲陽性，但確認試驗結果爲陰性，這表明此人不是艾滋病病毒感染者。有的人初篩和複檢均爲陽性，但確認試驗結果爲不確定，這樣的人一般要求3個月後再複查。複查時確認試驗若仍爲不確定，要再過3個月後複查。複查時確認結果仍爲不確定或爲陰性，則可排除其爲艾滋病病毒感染者。
判斷不確定結果的重要意義在於評價HIV感染的危險因素。低危人羣作確認試驗，若結果爲不確定，一般來說都不是HIV感染。如果反覆檢測呈現的都是一個條帶的結果，而大多數又找不出原因，這種情況要經複查後才能得出最後診斷。不過，可以告訴病人感染的可能性極小。處在血清轉換期而呈現不確定結果的病人，一般在1個月以後就可出現陽性結果。
對高度懷疑感染了HIV的人，臨牀又急於儘快得到結果，可進行病毒載量測定。HIV病毒載量測定是對HIV核酸的定量測定，可測出每毫升血樣中HIV核酸的拷貝數（一個HIV病毒顆粒含兩個拷貝）。這一檢測方法可作爲感染早期、抗體檢測結果爲不確定或抗體陰性者的輔助診斷。
HIV抗體檢測費用不高，幾十元即可，大部分人初篩陰性就不需要再作檢測。少數需要作確認試驗者則要花費幾百元。HIV病毒載量測定價格較昂貴，一般要花費千餘元。這些檢測要在國家批准的艾滋病檢測實驗室進行，這裏人員素質、技術水平均達標，並有嚴格的保密制度，保護個人隱私。國家批准的艾滋病初篩實驗室全國已有近2000個，主要分佈在疾病控制（衛生防疫）機構、出入境檢驗檢疫機構、醫療機構、性病防治和採供血機構。國家批准的艾滋病確認實驗室已有44個，主要分佈在各省疾病控制中心和大型醫療機構。
CD4細胞CD4T淋巴細胞在維持機體的細胞免疫和體液免疫中具有樞紐作用。HIV感染最主要的靶細胞就是CD4細胞。人體感染HIV後，CD4細胞的數量和功能的降低是引起人體免疫功能缺陷的主要原因。CD4細胞的數量是確定診斷、疾病分期、制定抗病毒治療和預防機會性感染方案的標準試驗指標。CD4細胞計數配合病毒載量測定還是預測疾病進程的可靠指標。HIV感染者的CD4細胞水平與病情發展及預後有密切關係，長期生存者外周血中CD4細胞水平長期穩定；而CD4細胞水平低下者，多數爲短期生存。
